| Tartalmi leírás: |
A matriptáz-2 (MT-2) a májsejtek felületén lévő transzmembrán szerin proteáz, amely a hepcidin termelését, a szervezet vasháztartását szabályozza. A matriptáz gátlás in vitro tanulmányozására adhat lehetőséget a hidrogél segítségével előállított 3D-s szerkezetbe ágyazott májsejt és májsejt- Kupffer sejt ko-kultúra. A 3D-s sejttenyésztés előnye a 2D-s technikákhoz képest, hogy a sejtek in vivo mikrokörnyezetének tulajdonságai jobban érvényesülnek, ezáltal fenotípusok, funkciójuk megtartottabb. Kísérleteink során két, 3-amidinofenilalanin szerkezetű matriptáz inhibitor (MI-441 és MI-461) hatásait vizsgáltuk májsejt mono- és Kupffer sejtekkel kiegészített ko- kultúrán (6:1 sejtaránnyal). Immunfluoreszcens festéssel nyomon követtük egy tight junction fehérje, az occludin elhelyezkedési mintázatát a két sejttenyészetben. Az extracelluláris hidrogén-peroxid szintet Amplex Red reagenssel történő mérésével határoztuk meg. Az esetleges gyulladásos válaszok kialakulásának vizsgálatára az interleukin-6 és az interleukin-8 (IL-6, -8) képződését és a gátlószerek hepcidin szintekre gyakorolt hatását sertés specifikus ELISA kittel határoztuk meg.
|
